Tumor markers expression levels in gastric cancer patient's peripheral blood by rt-pcr assessment / Avaliação por rt-pcr de expressão de marcadores tumorais em sangue periférico de pacientes com câncer gástrico

ABSTRACT BACKGROUND: Hematological recurrence is the second most frequent cause of failure in the treatment of gastric cancer. The detection of circulating tumor markers in peripheral blood by quantitative reverse transcriptase polymerase chain reaction (qRT-PCR) method may be a useful tool to predict recurrence and determine the patient's prognosis. However, no consensus has been reached regarding the association between the tumor markers level in peripheral blood and its impact on patient survival. AIMS: To evaluate the expression of the circulating tumor markers CK20 and MUC1 in peripheral blood samples from patients with gastric cancer by qRT-PCR, and to verify the association of their expression levels with clinicopathological characteristics and survival. METHODS: A total of 31 patients with gastric adenocarcinoma were prospectively included in this study. CK20 and MUC1 expression levels were analyzed from peripheral blood by the qRT-PCR technique. RESULTS: There was no statistically significant (p>0.05) association between CK20 expression levels and clinical, pathological, and surgical features. Higher MUC1 expression levels were associated with female patients (p=0.01). There was a correlation between both gene levels (R=0.81, p<0.001), and CK20 level and tumor size (R=0.39, p=0.034). CONCLUSIONS: CK20 and MUC1 expression levels could be assessed by qRT-PCR from total peripheral blood samples of patients with gastric cancer. CK20 levels were correlated to MUC1 levels as well as to tumor size. There was no difference in disease-free survival and overall survival regarding both genetic markers expression in this series.

RESUMO RACIONAL: A recorrência hematológica é a segunda causa mais frequente de falha no tratamento do câncer gástrico. A detecção de marcadores tumorais circulantes no sangue periférico, pelo método de reação em cadeia da polimerase de transcrição reversa quantitativa (qRT-PCR) pode ser uma ferramenta útil para prever a recorrência e determinar o prognóstico do paciente. No entanto, ainda não foi alcançado consenso em relação à associação entre o nível de marcadores tumorais circulantes no sangue periférico e seu impacto na sobrevida do paciente. OBJETIVOS: Avaliar a expressão de CK20 e MUC1 em amostras de sangue periférico de pacientes com câncer gástrico por meio de qRT-PCR e verificar a associação dos níveis de expressão com características clinicopatológicas e sobrevida. MÉTODOS: Trinta e um pacientes com adenocarcinoma gástrico foram incluídos, prospectivamente. Os níveis de expressão de CK20 e MUC1 foram analisados a partir de sangue periférico por meio de qRT-PCR. RESULTADOS: Não houve associação estatisticamente significativa (p>0,05) entre os níveis de expressão de CK20 com características clínicas, patológicas e cirúrgicas. Níveis mais elevados de expressão de MUC1 estavam associados a pacientes do sexo feminino (p=0,01). Houve correlação entre os níveis de ambos os genes (R=0,81, p<0,001), nível de CK20 e tamanho do tumor (R=0,39, p=0,034). CONCLUSÕES: Os níveis de CK20 e MUC1 podem ser avaliados por qRT-PCR a partir de amostras de sangue periférico total de pacientes com câncer gástrico, os níveis de CK20 estavam correlacionados com os de MUC1, assim como tamanho do tumor. Não houve diferença de sobrevida global ou livre de doença em relação à expressão de ambos marcadores genéticos nesta série.

Predição de risco de falha clínica baseada na detecção de biomarcadores tumorais em câncer de cavidade bucal / Biomarkers analysis for risk prediction of clinical failure in patients diagnosed with oral cavity cancer

INTRODUÇÃO: O carcinoma de células escamosas da cavidade oral (CEC) abrange uma ampla diversidade de células neoplásicas que possuem características moleculares heterogêneas quando expressadas pelo tumor, cuja detecção primária pode se tornar uma ferramenta útil tanto no diagnóstico inicial quanto no prognóstico nos pacientes portadores deste câncer. Os principais biomarcadores tumorais (BmTs) descritos e associados à carcinogênese do câncer de cavidade oral são: p53, p16, Ciclina-D1, EGFR e a E-caderina. OBJETIVO: O objetivo deste estudo foi avaliar o risco de recorrência a partir da detecção dos BmTs p16, p53, E-caderina, Ciclina-D1 e EGFR nos pacientes portadores de CEC submetidos ao tratamento multimodal. MATERIAL E MÉTODOS: Foram selecionados 100 pacientes com diagnóstico de CEC de cavidade oral e submetidos ao tratamento multimodal, os quais foram separados em dois grupos: A) Pacientes com CEC de assoalho de boca; B) Pacientes com CEC de língua, ambos os grupos tratados de forma multimodal. Após seleção foi realizada a análise por imunoistoquímica (IHQ) da expressão dos 05 biomarcadores acima descritos. Da mesma forma, foi realizada a análise dos dados demográficos e clínicos, além dos critérios morfológicos inerentes ao tumor para determinação dos fatores preditivos e prognósticos independentes. RESULTADOS: Após a análise retrospectiva dos dados da população de estudo, 51 pacientes (51%) apresentaram CEC na região do assoalho de boca e 49 (49%) na língua, com maior proporção de homens do que mulheres (69 % vs. 31%) e com idade maior ou igual a 60 anos (mediana: 62 anos/ R: 29-86 anos). A mediana de acompanhamento dos pacientes foi de 28 meses (R: 0-71 meses/média: 26 /DP: +-14,04) e do aparecimento da recorrência foi de 12 meses (mediana: 9 meses/ R: 0-37 meses). A maioria apresentou o estadiamento clínico-patológico inicial I e II (63,6%), pior padrão de infiltração tipo 3-5 (70,5%) e com presença de extensão extracapsular (EEC) (57,5%). Por outro lado, 21 pacientes (21,2%) expressaram p16, 87 (87,9%) a Ciclina-D1, 63 (63%) p53, 53 (53,5%) a E-caderina e 66 (66%) o EGFR. Após aplicação do teste Qui-quadrado foi observada associação estatisticamente significativa entre a expressão do p53 e o sexo (p: 0,01), p53 e tabagismo/etilismo (p: 0,04) e a expressão da E-caderina associada à presença de infiltrado linfoide (p: 0,03). Para análise da Sobrevida Global (SG) foi aplicado o teste de Kaplan Meier, sendo que a média foi de 53 meses (R: 42-61 meses). Na análise da Sobrevida Livre de Doença (SLD) a média foi de 31 meses (R: 27-24 meses). Finalmente, foi realizada a análise multivariada de Cox para cálculo da razão de risco (RR), onde foram observados para o EGFR RR: 4,97 (p: 0,016/R: 1,34-18,30) e a E-caderina RR: 0,294 (p: 0,056/ R: 0.084-1.03). CONCLUSÃO: A expressão de EGFR resultou como potencial biomarcador preditivo de risco de recorrência nos pacientes com CEC de cavidade oral e submetidos à abordagem multimodal, enquanto a E-caderina comportou-se como provável fator protetor contra o risco de recorrência neste mesmo grupo. Contudo, uma avaliação com maior coorte de pacientes se torna necessária para melhor compreensão do papel de outros BmTs, bem como a validação destes resultados na prática clínica.

INTRODUCTION: Oral Squamous Cell Carcinoma (OSCC) is the sixth most common cancer worldwide, characterized by heterogeneous cellular and histological features observed by different molecular parameters. The main biomarkers (BKs) associated with oral cavity tumorigenesis are p53, EGFR, Cyclin-D1, p16 and E-cadherin and their expression is associated with poor prognosis and multiples relapses, besides other histopathological prognostic factors associated to lower rates of overall (OS) and disease-free survival (DFS). OBJECTIVE: This study aims to confirm through histopathological assessment (HP) based on morphological tumor criteria and immunohistochemistry analysis (IHC) of the BKs the association with increased local recurrence in patients diagnosed with OSCC submitted to multimodal treatment at A.C. Camargo Cancer Center. MATERIAL AND METHODS: One hundred patients diagnosed with OSCC submitted to multimodal treatment during 2013-2017 were evaluated and distributed in two groups according to the primary local tumor: A) Patients with OSCC in the floor of the mouth and B) tongue OSCC, both groups treated with only surgery, surgery plus radiotherapy (RT) and/or surgery with RT and chemotherapy. IHC and HP analysis were performed of surgical specimen for detection of these five BKs such as EGFR, p53, E-cadherin, p16 and Cyclin D1. Moreover, after HP for morphological tumor featuring prognostic factors such as clinic-pathological staging, free surgical margins, extracapsular extension of lymph nodes, perineural and angiolymphatic invasion, depth of pattern infiltration were described. Demographic and clinical data were collected, and the nonparameter Chi-square statistical test was performed for determining association between them. OS and DFS rates were calculated using Kaplan Meier test and logRank test for univariate statistical analysis. Cox regression model was done, and the hazard ratio was established for each independent factor to predict clinical failure (p<=0.05). RESULTS: From 100 patients analyzed, 61% were male and 39% female. Regarding local primary tumor, 51% presented OSCC in the floor of the mouth and 49% in the tongue with a mean age of 62 years (R: 29-86). The median of follow-up was 28 months (mean: 26 / SD: +-14,04 / R: 0-71) and the mean of recurrence appearance was 12 months (median: 9/ R: 0-37). Most patients showed an initial stage (I-II) (63.6%), Worst pattern of invasion (WPOI) 3-5 (70.5%), extracapsular extension (EE) (57.5%). Regarding BKs expression, 21.2% p16, 87.9% Cyclin-D1, 63% p53, 53.5% E-cadherin, and 66% EGFR. It was observed a statistically significant association between p53 expression and for both sex (p: 0.01), p53 and smoking/alcohol consumption (p:0.04). E-cadherin was associated with lymph node infiltration (p: 0.03). The median OS was 80% vs 60% in 03 years (R: 42-61; I/II vs. III-IV p: 0.06); for DFS was 50% (p:0.22; I/II vs. III/IV) in 05 years (R: 27-24). Cox regression showed that EGFR expression HR: 4.9 (p: 0.02/ R: 1.34-18.30) and E-cadherin HR: 0.3 (p: 0.06/R: 0.084-1.03) and EE as morphological tumor criteria (HR: 3.68 / p: 0.056 / R: 1.00-13.48) are independent factors for prediction of clinical failure. CONCLUSION: EGFR expression is a potential biomarker for prediction of oral cancer recurrence in patients submitted to multimodal management; however, the loss of E-cadherin expression was considered as a protective factor against OSCC recurrence for this group. Furthermore, longitudinal studies must be performed to validate these results in the clinical practice

BRAF and NRAS prognostic values in conjunctival melanoma: analysis and literature review / Análise do valor prognóstico dos marcadores BRAF e NRAS no melanoma da conjuntiva e revisão da literatura

ABSTRACT Purpose: Conjunctival melanoma is a rare and aggressive tumor with a propensity for regional and distant metastases. This study aimed to analyze BRAF/NRAS markers in conjunctival melanoma and their relationship with tumor recurrences and patient prognosis. Methods: This retrospective, observational, single-center study included consecutive patients with an anatomopathological diagnosis of conjunctival melanoma, registered between January 1992 and December 2019. BRAF/NRAS mutations were analyzed using cobas®4800 kit (Roche®) in samples obtained by excisional or map biopsy. Additionally, the presence of other associated precancerous or tumor lesions was assessed. Results: A total of 12 patients with positive histological samples for conjunctival melanoma were included (7 women, 5 men), with a mean age at diagnosis of 60 years and a mean evolution time of 6.38 ± 3.4 years. BRAF V600E mutation was observed in three biopsies (25%), similar to NRAS Q61X (25%). Recurrences occurred in all patients with positive BRAF or NRAS mutation, and five of these patients developed systemic dissemination (83.33%). Moreover, four of six patients with mutated BRAF or NRAS (66.66%) had histopathological findings of tumor or precancerous lesions. Conclusions: BRAF and NRAS mutations may be risk factors for recurrence and shorter survival in conjunctival melanoma, which would make these patients candidates for targeted therapies and comprehensive and individualized follow-up. All these data warrant standardized prospective studies.

RESUMO Objetivo: O melanoma da conjuntiva é um tumor raro e agressivo, com propensão à disseminação metastática regional e distante. Este estudo tem como objetivo analisar os marcadores BRAF e NRAS no melanoma da conjuntiva e sua relação com recidivas tumorais e com o prognóstico do paciente. Métodos: Este foi um estudo retrospectivo, observacional e unicêntrico de pacientes consecutivos com diagnóstico anatomopatológico de melanoma da conjuntiva feito entre janeiro de 1992 e dezembro de 2019. As mutações BRAF e NRAS foram analisadas com o kit cobas® 4800 (Roche®) em amostras obtidas através de biópsia excisional ou por mapa. Além disso, foi avaliada a presença de lesões pré-cancerosas ou tumorais associadas. Resultados: Foram incluídos 12 pacientes com amostras histológicas positivas para melanoma da conjuntiva (7 mulheres e 5 homens), com idade média ao diagnóstico de 60 anos e tempo médio de evolução de 6,38 ± 3,4 anos. A mutação BRAF V600E foi encontrada em 3 biópsias (25%), bem como a NRAS Q61X (25%). Ocorreram recidivas em todos os pacientes positivos para mutações de BRAF ou NRAS e 5 desses pacientes desenvolveram disseminação sistêmica (83,33%). Além disso, 4 dos 6 pacientes com BRAF ou NRAS mutante (66,66%) apresentaram achados histopatológicos de lesões tumorais ou pré-cancerosas. Conclusões: As mutações BRAF e NRAS podem ser fatores de risco para recorrência e menor sobrevida no melanoma da conjuntiva, o que tornaria esses pacientes candidatos a terapias direcionadas e a um acompanhamento mais abrangente e individualizado. Todos esses dados justificam mais estudos prospectivos padronizados.

Recentes avanços em biomarcadores para diagnóstico, prognóstico e avaliação terapêutica no câncer cervical / Recent advances in biomarkers for diagnosis, prognosis, and therapeutic evaluation in cervical cancer

Objetivos: revisar os estudos clínicos acerca de biomarcadores para o câncer cervical publicados nos últimos 10 anos, com foco no diagnóstico, prognóstico e avaliação do tratamento. Metodologia: as bases de dados PubMed, Web of Science e Science Direct foram pesquisadas utilizando os descritores "Uterine Cervical Neoplasms" e "Biomarkers". Foram selecionados os artigos originais publicados em inglês ou português, no período de 2011 a 2021. Após uma triagem pelos títulos e resumos dos artigos, aqueles relacionados ao objetivo do estudo foram lidos integralmente para a decisão final de inclusão na revisão. Os trabalhos que atenderam todos os critérios de seleção tiveram seus dados extraídos, principalmente, no que se refere ao tipo e objetivo do biomarcador proposto, população do estudo, tamanho da amostra, metodologia utilizada e principais desfechos obtidos. Resultados: esta estratégia de busca e seleção resultou em 22 artigos publicados nos últimos 10 anos na temática de interesse. Ocorreu um grande empenho na investigação de biomarcadores séricos para o câncer cervical, com a vantagem de serem minimamente invasivos. Houve destaque para marcadores genéticos e moleculares, como aqueles voltados para a metilação do DNA, detecção de polimorfismos, padrões de expressão de micro-RNA e expressão de genes relacionados à proliferação, imortalização e invasão celular. Conclusão: os dados reunidos encorajam a ampliação das pesquisas para aprimorar e validar a eficiência destes biomarcadores em grandes populações. É evidente o potencial dos biomarcadores como estratégia para melhorar o manejo do diagnóstico e o tratamento do câncer cervical, sendo que a utilização de marcadores genéticos parece ser o futuro dos biomarcadores para o câncer cervical

Aims: to review clinical studies on biomarkers for cervical cancer published in the last 10 years, focusing on the diagnosis, prognosis, and treatment evaluation. Methods: PubMed, Web of Science, and Science Direct databases were searched using the descriptors "Uterine Cervical Neoplasms" and "Biomarkers". Original articles published in English or Portuguese from 2011 to 2021 were selected. After screening by the titles and abstracts of the articles, those related to the objective of the study were read in full for the final decision of inclusion in the review. The studies that met all the selection criteria had their data extracted, especially regarding the type and objective of the biomarker proposed, study population, sample size, methodology used, and main outcomes obtained. Results: this search and selection strategy resulted in 22 articles published in the last 10 years on the topic of interest. There was a great effort to investigate serum biomarkers for cervical cancer, with the advantage of being minimally invasive. There was an emphasis on genetic and molecular markers, such as those focused on DNA methylation, detection of polymorphisms, expression patterns of microRNA, and expression of genes related to cell proliferation, immortalization, and invasion.Conclusions: the data gathered encourage expanded research to improve and validate the efficiency of these biomarkers in large populations. The potential of biomarkers as a strategy to improve the management of cervical cancer diagnosis and treatment is evident, and the use of genetic markers appears to be the future of biomarkers for cervical cancer

Can we use Ki67 expression to predict prostate cancer aggressiveness? / Podemos usar a expressão de Ki67 para prever a agressividade do câncer de próstata?

ABSTRACT Introduction: specialists have an urge for biomarkers that can discriminate indolent prostate cancer from aggressive tumors. Ki67 is a proliferation marker, and its expression is associated with the aggressiveness of several cancers. Objective: analyze the expression of Ki67 in prostate cancer samples correlating with the aggressiveness of the disease. Methods: Ki67 mRNA levels were determined utilizing data from a TCGA cohort (Tumor(n)=492 and control(n)=52). The protein expression was determined on 94 biopsies from patients by immunohistochemical assay. Results: in mRNA, the Ki67 upregulation is associated with cancer tissue (p<0.0001) and worst disease-free survival (p=0.035). The protein upregulation is associated with increase of the ISUP score (p<0.0001), cancer stage (p=0.05), biochemical recurrence (p=0.0006) and metastasis (p<0.0001). We also show a positive correlation between Ki67 expression and ISUP score (r=0.5112, p<0.0001) and disease risk stratification (r=0.3388, p=0.0009). Ki67 expression is a factor independently associated with biochemical recurrence (p=0.002) and metastasis (p<0.0001). Finally, the patients with high Ki67expression shows better survival regarding biochemical recurrence (p=0.008) and metastasis (p=0.056). Patients with high Ki67 expression are 2.62 times more likely to develop biochemical recurrence (p=0.036). Conclusion: Ki67 upregulation is associated with prostate cancer aggressiveness.

RESUMO Introdução: especialistas precisam biomarcadores que podem discriminar o câncer de próstata indolente de tumores agressivos. Ki67 é um marcador de proliferação, e sua expressão está associada à agressividade de vários tumores. Objetivo: analisar a expressão do Ki67 em amostras de câncer de próstata correlacionando com a agressividade da doença. Métodos: os níveis de mRNA de Ki67 foram determinados utilizando dados de uma coorte de TCGA (Tumor(n)=492 e controle(n)=52). A expressão da proteína foi determinada em 94 biópsias de pacientes por ensaio imuno-histoquímica. Resultados: no mRNA, a superexpressão Ki67 está associada ao tecido canceroso (p<0,0001) e à pior sobrevida livre de doença (p=0,035). A superexpressão proteica está associada ao aumento do escore ISUP (p<0,0001), estágio de câncer (p=0,05), recorrência bioquímica (p=0,0006) e metástase (p<0,0001). Também mostramos uma correlação positiva entre a expressão Ki67 e o escore ISUP (r=0,5112, p<0,0001) e a estratificação de risco de doença (r=0,3388, p=0,0009). A expressão Ki67 é um fator independentemente associado à recorrência bioquímica (p=0,002) e metástase (p<0,0001). Finalmente, os pacientes com alta expressão de Ki67 expression mostram melhor sobrevivência em relação à recorrência bioquímica (p=0,008) e metástase (p=0,056). Os pacientes com alta expressão de Ki67 são 2,62 vezes mais propensos a desenvolver recorrência bioquímica (p=0,036). Conclusão: a superexpressão Ki67 está associada à agressividade do câncer de próstata.

Expressão do RNAm e metilação do DNA do gene DKK2 em câncer colorretal / Rnam expression and dna methylation of dkk2 gene in colorectal câncer

ABSTRACT BACKGROUND: Colorectal cancer is the third most common neoplasm in the world. Methylation of tumor related genes in CpG islands can cause gene silencing and been involved in the development of cancer. The potential role of DKK2 as a biomarker for early diagnosis of colorectal cancer remains unclear. OBJECTIVE: The aim of the study was to evaluate the profile of methylation and RNAm expression of DKK2 as potential predictors of colorectal cancer diagnosis and prognosis. METHODS: Expression of mRNAs encoding DKK2 in 35 colorectal cancer tissues was quantified using real-time polymerase chain reaction analysis. The DNA methylation was studied by high resolution melting analysis. The general characteristics of the patients were collected. DKK2 methylation and expression were compared to clinical, pathological aspects and overall survival. RESULTS: Among the 35 patients studied, 18 were male, 10 were on right colon and 25 on left colon. Among the 20 patients with high hypermethylation, 15 of them had mRNA low expression of DKK2. There was no significant association between DKK2 promoter methylation and mRNA DKK2 expression and clinical or pathological features. DKK2 promoter methylation (P=0.154) and DKK2 RNA expression (P=0.345) did not show significant correlation with overall survival. CONCLUSION: DKK2 promoter methylation and DKK2 RNA status appear to be biomarkers of cancer diagnosis but not predictors of prognosis.

RESUMO CONTEXTO: O câncer colorretal é a terceira neoplasia mais comum no mundo. A metilação de alguns genes nas ilhas CpG podem causar silenciamento gênico e estar envolvida no desenvolvimento de câncer. O potencial papel de DKK2 como um biomarcador no diagnóstico precoce de CCR permanece incerto. OBJETIVO: O objetivo do estudo foi avaliar o perfil de metilação e expressão de RNAm do gene DKK2 para identificar preditores potenciais de diagnóstico e prognóstico de CCR. MÉTODOS: A expressão de mRNAs que codificam DKK2 em 35 tecidos de câncer colorretal foi quantificada por reação em cadeia da polimerase em tempo real e a metilação do DNA foi verificada por análise de alta resolução. As características gerais dos pacientes foram coletadas. A metilação e expressão de DKK2 foram comparadas aos aspectos clínicos, patológicos e à sobrevida global. RESULTADOS: Entre os 35 pacientes estudados, 18 eram do sexo masculino, 10 tumores eram do cólon ascendente ou transverso e 25 do descendente ou reto. Entre os 20 pacientes com hipermetilação, 12 deles apresentaram baixa expressão de RNAm do gene DKK2. Não houve associação significativa entre a metilação do promotor de DKK2 e a expressão de RNAm de DKK2 e características clínicas ou patológicas. A metilação do promotor de DKK2 e a expressão do RNA de DKK2 não mostraram correlação com sobrevida global dos pacientes com CCR. CONCLUSÃO: A metilação do gene promotor e a expressão do RNAm do gene DKK2 parecem ser biomarcadores de diagnóstico de câncer, mas não se mostraram úteis na avaliação prognóstica.

Are stem cell marker expression and cd133 analysis relevant to differentiate colorectal cancer? / A expressão de marcadores de células-tronco e a análise do cd133 são relevantes na diferenciação do câncer colorretal?

ABSTRACT Background: CD133 and AXL have been described as cancer stem cell markers, and c-MYC as a key regulatory cellular mechanism in colorectal cancer (CRC). Aim: Evaluate the prognostic role of the biomarkers CD133, AXL and c-MYC and their association with clinicopathologic characteristics in colorectal adenocarcinomas and adenomas. Methods: A total of 156 patients with UICC stage I-IV adenocarcinomas (n=122) and adenomas (n=34) were analyzed. Tissue microarrays (TMA) from primary tumors and polyps for CD133, c-MYC and AXL expression were performed and analyzed for their significance with clinicopathologic characteristics. Results: Poorly differentiated adenocarcinomas and disease progression were independent risk factors for poor overall survival. The median overall survival time was 30 months. Positive CD133 expression (35.9% of all cases), particularly of right-sided CRCs (44.8% of the CD133+ cases), was negatively correlated with death in the univariate analysis, which did not reach significance in the multivariate analysis. c-MYC (15.4% of all cases) was predominantly expressed in advanced-stage patients with distant (non-pulmonary/non-hepatic) metastasis. AXL expression was found only occasionally, and predominantly dominated in adenomas, with less penetrance in high-grade dysplasia. Conclusions: CD133 expression was not associated with inferior overall survival in CRC. While AXL showed inconclusive results, c-MYC expression in primary CRCs was associated with distant metastasis.

RESUMO Racional: CD133 e AXL são descritos na literatura como marcadores de células-tronco tumorais, e c-MYC cumpre papel chave como mecanismo de regulação celular no câncer colorretal (CCR). Objetivo: Avaliar o papel prognóstico dos biomarcadores CD133, AXL e c-MYC e sua associação com características clinicopatológicas de adenocarcinomas e adenomas colorretais. Métodos: Um total de 156 pacientes com adenocarcinomas de estádio UICC I-IV (n=122) e adenomas (n=34) colorretais foram avaliados. Microarranjos teciduais (TMA) dos tumores primários e adenomas foram realizados em busca de expressão de CD133, c-MYC e AXL, com posterior análise de relação significativa com características clinicopatológicas. Resultados: Adenocarcinomas pobremente diferenciados e progressão de doença foram fatores de risco independentes para má sobrevida global. A taxa mediana de sobrevida global foi de 30 meses. Expressão positiva de CD133 (35,9% dos casos), particularmente em cânceres de cólon direito (44,8% dos casos CD133+), correlacionou-se negativamente com óbito na análise univariada, sem significância estatística na análise multivariada. c-MYC (15,4% dos casos) teve predomínio de expressão em pacientes com estádio avançado com metástases distantes (não-pulmonares/não-hepáticas). Expressão de AXL foi pouco encontrada, com predomínio em adenomas, com menor penetrância em displasia de alto grau. Conclusão: Expressão de CD133 não se associou com sobrevida global inferior em CCR. Enquanto AXL demonstrou resultados inconclusivos, expressão de c-MYC em tumores primários se associou-se à metástases à distância.

Marcadores moleculares para diferenciação diagnóstica do carcinoma urotelial / Molecular markers for diagnostic differentiation of urothelial carcinoma

A maioria das neoplasias na bexiga tem início no urotélio. O carcinoma das células de transição é o mais comum. A citologia urinária juntamente com a cistoscopia, permanece como ferramenta de diagnóstico e monitoração. Alguns marcadores potenciais foram reconhecidos em espécimes de citologia urinária, incluindo a proteína p53. O objetivo desta pesquisa foi descrever os marcadores moleculares para diferenciação diagnóstica do carcinoma urotelial. Foi realizado um estudo de revisão de literatura. Quando observamos o carcinoma urotelial, notamos que há dissensões resultantes em variantes histológicas; sendo assim, utilizamos a imuno-histoquímica para confirmar sua origem. O urotelioma apresenta microhematúria, macrohematúria indolor. As células apresentam ocasionalmente um arranjo "semelhante a janela". Os biomarcadores baseiam-se na expressão diferencial das proteínas, DNA, RNA ou marcadores relacionados ao câncer. Observou-se que a citologia apresenta uma baixa sensibilidade, porém, em concentrações mais altas, a sua especificidade é >90%. A sensibilidade combinada da maioria dos marcadores variou e a especificidade da maioria variou entre 70% a 90%, menor que a citologia urinária. Nisso, os marcadores passam por estudos constantes para melhorar as tecnologias atuais. Embora a técnica seja de alto custo, a utilização e combinação de biomarcadores juntamente com a citologia urinária tem resultado na alta sensibilidade e especificidade.

The majority of neoplasms in the bladder have no onset urothelium. Transitional cell carcinoma is the most common. A urinary cytology together with cystoscopy remain as a diagnostic and monitoring toll. Some potential molecular markers were recognized in urinary cytology specimens, including the p53 protein. The objective of this research was to describe the molecular markers for diagnostic differentiation of urothelial carcinoma. A review of the literature was performed. When we observe the urothelial carcinoma, we notice that there are dissensions resulting in histological variants, and, therefore, it uses immunohistochemistry to confirm your origin. Urotelioma presents microhematúria, painless macrohematúria. As cells do not urotelioma occasionally transformed a "window-like" arrangement. The biomarkers are based on the differential expression of proteins, DNA, RNA or cancer-related markers. It was observed that cytology has a low sensitivity, but at higher concentrations its specificity (>90%). A combined sensitivity of most markers ranged and the specificity of the majority varied from 70% to 90%, lower than urinary cytology. In this, the markers go through constant studies to improve it as current technologies. Although a high-cost technique, a use and combination of biomarkers with urinary cytology results in high sensitivity and specificity.

High D-dimer levels are associated with prostate cancer

RESUMO OBJETIVO O câncer de próstata é uma das neoplasias mais comuns em homens. Os principais fatores de risco para a ativação da coagulação e trombose são malignidade e idade mais avançada. O risco de trombose pode estar associado ao aumento do nível dos marcadores de coagulação, tais como o fibrinogênio e D-dímero. O objetivo deste estudo é avaliar a relação entre os marcadores de coagulação e o câncer de próstata. METODOLOGIA Este estudo prospectivo incluiu os pacientes que foram submetidos à biópsia de próstata transretal guiada por ultrassonografia e que passaram por cirurgia da próstata entre janeiro de 2015 e janeiro de 2016. Os níveis no plasma de antígeno prostático específico (PSA), PSA livre (fPSA), porcentagem de fPSA, D-dímero e fibrinogênio foram medidos antes dos procedimentos. Os pacientes foram divididos em dois grupos de acordo com os resultados de patologia. Os pacientes com hiperplasia benigna da próstata foram colocados no grupo 1 e os pacientes com câncer de próstata no grupo 2. RESULTADOS No total, 76 pacientes foram incluídos neste estudo. Houve um total de 53 pacientes no grupo 1 e 23 pacientes no grupo 2. A idade média dos pacientes e os níveis de PSA, fPSA, fibrinogênio e D-dímero foram, respectivamente, 65.33 ± 7.47 anos, 8.21 ± 4.59, 1.41 ± 0.74 ng/ml, 309.75 ± 80.46 mg/dl e 0.42 ± 0.39 µg/ml no grupo 1. No grupo 2, a idade média dos pacientes e os níveis de PSA, fPSA, fibrinogênio e D-dímero foram, respectivamente, 66.08 ± 6.7 anos, 145.69 ± 509.35, 7.32 ± 15 ng/ml, 312.16 ± 69.48 mg/dl, 1.09 ± 2.11 µg/ml. Biópsia da próstata e cirurgia transuretal foram realizadas em 64 (%84,21) e 12 (%15,79) pacientes, respectivamente. CONCLUSÃO O presente estudo demonstrou que os níveis de D-dímero no plasma foram maiores em pacientes com câncer de próstata. Novos estudos com um maior número de pacientes são necessários para definir a relação entre câncer de próstata e distúrbios de coagulação.

Is there a clinical pathological correlation of colorectal adenocarcinoma with the immunohistochemical expression of opn and abcb5? / Há correlação clínicopatológica do adenocarcinoma colorretal com a expressão imunoistoquímica do opn e abcb5?

ABSTRACT Background: Studies with biomarkers in TMA (tissue microarray) have been showing important results regarding its expression in colon cancer. Aim: Correlate the expression profile of the OPN and ABCB5 biomarkers with the epidemiological and clinicopathological characteristics of the patients, the impact on the progression of the disease and the death. Method: A total of 122 CRC patients who underwent surgical resection, immunomarking and their relationship with progression and death events were evaluated. Result: The average age was 61.9 (±13.4) years. The cases were distributed in 42 (35.9%) in the ascending/transverse colon, 31 (26.5%) in the sigmoid, 27 in the rectum (23.1%), 17 (14.5%) in the descending colon. Most patients had advanced disease (stages III and IV) in 74 cases (60.9%). There was a predominance of moderately differentiated tumors in 101 samples (82.8%); despite this, the poorly differentiated subtype proved to be an independent risk factor for death in 70%. Metastasis to the liver proved to be an independent risk factor for death in 75% (18/24), as well as patients with primary rectal tumors in 81.5% (22/27). Conclusion: The immunohistochemical expression of the OPN and ABCB5 markers was not associated with epidemiological and clinicopathological characteristics. Regarding the progression of disease and death, it was not possible to observe a correspondence relationship with the evaluated markers.

RESUMO Racional: Estudos com biomarcadores com TMA (tissue microarray) vêm demostrando resultados importantes em relação à expressão de biomarcadores em câncer de cólon. Objetivo: Correlacionar o perfil de expressão dos biomarcadores OPN e ABCB5 com as características epidemiológicas e clinicopatológicas dos pacientes, o impacto na progressão de doença e no evento óbito. Método: Foram avaliados 122 pacientes de CCR submetidos à ressecção cirúrgica e à imunomarcação e relação com os eventos progressão e óbito. Resultado: A média de idade encontrada foi de 61,9 (±13,4) anos. Os casos distribuíram-se em 42 (35,9%) no cólon ascendente/transverso, 31 (26,5%) no sigmoide, 27 no reto (23,1%), 17 (14,5%) no cólon descendente. A maioria dos pacientes apresentou doença avançada (estadio III e IV) em 74 casos (60,9%). Houve predomínio de tumor moderadamente diferenciado em 101 amostras (82,8%); apesar disso, o subtipo pouco diferenciado mostrou-se como fator de risco independente para óbito em 70% dos casos. Metástase para o fígado mostrou-se fator de risco independente para óbito em 75% dos casos (18/24), assim como pacientes com tumores primários de reto em 81,5% (22/27). Conclusão: A expressão imunoistoquímica dos marcadores OPN e ABCB5 não apresentou associação com as características epidemiológicas e clinicopatológicas. Em relação à progressão de doença e evento óbito, não se conseguiu observar relação de correspondência com os marcadores avaliados.

Are stem cell marker expression and cd133 analysis relevant to differentiate colorectal cancer? / A expressão de marcadores de células-tronco e a análise do cd133 são relevantes na diferenciação do câncer colorretal?

ABSTRACT Background: CD133 and AXL have been described as cancer stem cell markers, and c-MYC as a key regulatory cellular mechanism in colorectal cancer (CRC). Aim: Evaluate the prognostic role of the biomarkers CD133, AXL and c-MYC and their association with clinicopathologic characteristics in colorectal adenocarcinomas and adenomas. Methods: A total of 156 patients with UICC stage I-IV adenocarcinomas (n=122) and adenomas (n=34) were analyzed. Tissue microarrays (TMA) from primary tumors and polyps for CD133, c-MYC and AXL expression were performed and analyzed for their significance with clinicopathologic characteristics. Results: Poorly differentiated adenocarcinomas and disease progression were independent risk factors for poor overall survival. The median overall survival time was 30 months. Positive CD133 expression (35.9% of all cases), particularly of right-sided CRCs (44.8% of the CD133+ cases), was negatively correlated with death in the univariate analysis, which did not reach significance in the multivariate analysis. c-MYC (15.4% of all cases) was predominantly expressed in advanced-stage patients with distant (non-pulmonary/non-hepatic) metastasis. AXL expression was found only occasionally, and predominantly dominated in adenomas, with less penetrance in high-grade dysplasia. Conclusions: CD133 expression was not associated with inferior overall survival in CRC. While AXL showed inconclusive results, c-MYC expression in primary CRCs was associated with distant metastasis.

RESUMO Racional: CD133 e AXL são descritos na literatura como marcadores de células-tronco tumorais, e c-MYC cumpre papel chave como mecanismo de regulação celular no câncer colorretal (CCR). Objetivo: Avaliar o papel prognóstico dos biomarcadores CD133, AXL e c-MYC e sua associação com características clinicopatológicas de adenocarcinomas e adenomas colorretais. Métodos: Um total de 156 pacientes com adenocarcinomas de estádio UICC I-IV (n=122) e adenomas (n=34) colorretais foram avaliados. Microarranjos teciduais (TMA) dos tumores primários e adenomas foram realizados em busca de expressão de CD133, c-MYC e AXL, com posterior análise de relação significativa com características clinicopatológicas. Resultados: Adenocarcinomas pobremente diferenciados e progressão de doença foram fatores de risco independentes para má sobrevida global. A taxa mediana de sobrevida global foi de 30 meses. Expressão positiva de CD133 (35,9% dos casos), particularmente em cânceres de cólon direito (44,8% dos casos CD133+), correlacionou-se negativamente com óbito na análise univariada, sem significância estatística na análise multivariada. c-MYC (15,4% dos casos) teve predomínio de expressão em pacientes com estádio avançado com metástases distantes (não-pulmonares/não-hepáticas). Expressão de AXL foi pouco encontrada, com predomínio em adenomas, com menor penetrância em displasia de alto grau. Conclusão: Expressão de CD133 não se associou com sobrevida global inferior em CCR. Enquanto AXL demonstrou resultados inconclusivos, expressão de c-MYC em tumores primários se associou-se à metástases à distância.

Tissue fibrosis and its correlation with malignancy in canine mammary tumors / Fibrosis tisular y su correlación con malignidad en neoplasias mamarias caninas / Fibrose tecidual e sua correlação com a malignidade em neoplasias mamárias em cadelas

Abstract Background: Fibrosis is present in several pathologies associated with mammary carcinogenesis. Objective: To evaluate and quantify the fibrosis present in malignant and benign mammary neoplasms in bitches. Methods: Eighty-three samples were divided according to histopathological diagnosis into benign (n= 21) and malignant (n= 62) neoplasms. Haematoxylin-eosin and Masson's trichrome were used to locate the connective tissue, and the extent of fibrosis was assessed with image software. Results: Benign neoplasms were classified into adenomas (cystic, complex, and tubular), benign mixed tumor, and ductal and lobular hyperplasia. Malignant neoplasms were classified as carcinomas (complex, mixed tumor, in situ tubular, tubulopapillary, and solid). Grade I was the most prevalent histopathological class, followed by grade II and III. Fibrosis was classified as severe, moderate, or discrete. No significant (p >0.05) difference was observed for the percentage of fibrosis between malignant and benign group neoplasms. However, difference (p=0.028) was found for fibrosis percentage between histopathological subtypes of tumors. The benign subtype of lobular hyperplasia presented differences between cystic adenoma and benign mixed tumor. The in situ malignant tubular carcinoma subtype presented differences between solid and tubulopapillary carcinoma. Conclusions: Fibrosis in canine mammary tumors can be estimated with Massons's trichrome staining.

Resumen Antecedentes: La fibrosis está presente en diversas patologías asociadas con carcinogénesis mamaria. Objetivo: Analizar si existe una correlación entre fibrosis tisular y malignidad en tumores mamarios caninos. Métodos: 83 muestras de tejido mamario fueron divididas en masas benignas (n=21) y malignas (n=62), de acuerdo con sus características histopatológicas. En estas muestras se utilizaron las coloraciones de hematoxilina-eosina y tricromo de Masson para localizar el tejido conectivo y se analizó la proporción y cuantificación de fibrosis en los mismos con un software de imagen especializado. Resultados: Las masas mamarias benignas se diagnosticaron como adenomas (quístico, complejo y tubular), tumor mixto benigno, e hiperplasia ductal y lobular; las masas malignas, como carcinomas (complejo, tumor mixto, tubular in situ, túbulopapilar y solido). Los tumores grado I fueron los más prevalentes, seguidos por los grados II y III. La fibrosis se clasifico como discreta, moderada o severa. No se observó diferencia (p>0,05) en el porcentaje de fibrosis entre neoplasias benignas y malignas. No obstante, el porcentaje de fibrosis mostro diferencias (p=0,028) entre subtipos tumorales. La hiperplasia lobular fue diferente en relación a los adenomas quísticos y tumor mixto mamario. El subtipo maligno carcinoma tubular in situ fue diferente respecto a los carcinomas complejo, mixto maligno, sólido, y tubulopapilar. Conclusiones: La fibrosis en los tumores mamarios caninos se puede estimar por la tinción con tricromo de Masson.

Resumo Antecedentes: A fibrose participa em diversas patologias e ainda possui função adicional associada à carcinogênese mamária. Objetivo: Objetivou-se avaliar a fibrose e correlacionar com a malignidade nas neoplasias mamárias em cadelas. Métodos: 83 amostras foram divididas em dois grupos baseado no diagnóstico histopatológico: neoplasias benignas (n= 21) e neoplasias malignas (n= 62). Hematoxilina e eosina e Tricômico de Masson foram usadas para vizibilização de tecido conjuntivo e avaliação de fibrose através de programa de imagens. Resultados: As neoplasias benignas foram: adenoma (cístico, complexo e tubular), tumor misto benigno, hiperplasia ductal e lobular. As malignas foram: carcinoma complexo, em tumor misto maligno, tubular in situ, tubulopapilar e sólido. O grau histopatológico prevalente foi grau I, seguido do grau II e III. A fibrose nas neoplasias mamárias malignas foi classificada como severa, moderada e discreta. Não houve diferença significativa (p>0,05) na porcentagem de fibrose entre neoplasias malignas e benignas. A estatística revelou diferença significativa (p=0,028) na porcentagem de fibrose em relação ao diagnóstico histopatológico. O subtipo benigno hiperplasia lobular apresentou diferença entre o adenoma cístico e o tumor misto benigno. O subtipo maligno carcinoma tubular in situ apresentou diferença entre carcinoma complexo, misto maligno, sólido e tubulopapilar. Conclusões: A fibrose nos tumores mamários caninos pode ser estimada através da coloração de tricrômio de Masson.

Evaluation of survivin immunoexpression in the differentiation of high- and low-grade breast ductal carcinoma in situ / Expressão da proteína survivina em carcinoma ductal in situ de mama de alto e de baixo grau

ABSTRACT Objective To evaluate the expression of survivin protein in low- and high-grade ductal carcinoma in situ. Methods Breast tissue fragments obtained by incisional biopsy and surgical procedures of 37 women with ductal carcinoma in situ of the breast were subdivided into two groups: Group A, composed of women with low-grade ductal carcinoma in situ, and Group B, women with high-grade ductal carcinoma in situ. Survivin protein expression test was performed by immunohistochemistry, using a monoclonal antibody clone I2C4. The criterion to evaluate survivin immunoexpression was based on the percentage of neoplastic cells that presented brown-gold staining. This criterion was positive when the percentage of stained cells was ≥10%. Results The survivin protein was expressed in 22 out of 24 cases of high-grade ductal carcinoma in situ (78%), whereas, in Group A, of low-grade ductal carcinoma in situ (n=13), it was positive in only 6 cases (21.40%; p=0.004). Conclusion The frequency of expression of survivin was significantly higher in the group of patients with high-grade ductal carcinoma in situ compared to those in the low-grade ductal carcinoma in situ group.

RESUMO Objetivo Avaliar a imunoexpressão da proteína survivina nos carcinomas ductais in situ de mama de baixo e de alto graus. Métodos Fragmentos de tecido mamários obtidos por biópsia incisional e procedimentos cirúrgicos de 37 mulheres acometidas por carcinoma ductal in situ de mama foram subdivididos em dois grupos: Grupo A, formado por mulheres com carcinoma ductal in situ de baixo grau; e Grupo B, por mulheres com carcinoma ductal in situ de alto grau. A pesquisa de expressão da proteína survivina foi realizada pela técnica de imuno-histoquímica, utilizando-se anticorpo monoclonal clone I2C4. O critério de avaliação da imunoexpressão da survivina baseou-se na percentagem de células neoplásicas que apresentava coloração castanho-dourada. Considerouse tal critério positivo quando a percentagem de células apresentasse marcação ≥10%. Resultados A proteína survivina apresentou-se expressa em 22 dos 24 casos de carcinoma ductal in situ de alto grau (78%), enquanto no Grupo A, de carcinoma ductal in situ de baixo grau (n=13), apresentou-se positiva em apenas 6 casos (21,40%; p=0,004). Conclusão O índice de frequência de expressão da survivina foi significativamente mais elevado no grupo de pacientes com carcinoma ductal in situ de alto grau, quando comparado às do grupo com carcinoma ductal in situ de baixo grau.

Biomarcadores tumorais pleurais na prática clínica: úteis? Inúteis? Incompreendidos? / Pleural tumor markers in clinical practice: useful? Useless? Misunderstood?

Os biomarcadores tumorais dosados no líquido pleural possuem relevância estatística e clínica para serem utilizados como sugestão do diagnóstico diferencial entre derrames pleurais malignos e benignos nos casos onde os primeiros resultados da citopatologia e histopatologia são ambos inconclusivos AU

Tumor biomarkers measured in pleural fluid have statistical and clinical relevance for use as a suggestion of differential diagnosis between benign and malignant pleural effusions in cases where the first results of cytopathology and histopathology are both inconclusive AU.